کلونینگ dna واکسن کایمریک متشکل از ژن های eae, tir و espa باکتری escherichia coli o157:h7 و بررسی ایمنی زایی بعد از تزریق درون ماهیچه ای
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شاهد - دانشکده علوم پایه
- نویسنده کوثر شریعتی مهر
- استاد راهنما سیدلطیف موسوی گرگری جعفر امانی
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1390
چکیده
عفونت با باکتری escherichia coli o157:h7 می تواند منجر به اسهال خونی یا سندرم اورمی همولیتیک با آسیب کلیوی (بیماری نادر اما کشنده) شود. پروتئین های intimin ، tir و espa فاکتورهای بیماری زای بیان شده توسط لوکوس lee باکتری e.coli انتروهموروژیک هستند. این باکتری به پروتئین espa به عنوان رابطی برای انتقال tir به سلول میزبان نیاز دارد و intimin در سطح قرار می گیرد که باکتری را به tir منتقل شده متصل می کند. در این تحقیق dna واکسن متشکل از ژن های eae, tir و espa برای بررسی ایمنی زایی مورد تزریق قرار گرفتند. ژن مولتی مر برو روی سه وکتور یوکاریوتی paav-mcs-gfp و pci-neo و pegfp-n1 کلون شد. paav-mcs-gfp و pegfp-n1 برای بررسی بیان ژن در سلول های t.293 مورد استفاده قرار گرفتند. و دو وکتور paav-mcs-gfp و pci-neo و به عنوان dna واکسن به کار رفتند. گروه های تست چهار بار با 50 میکروگرم paav-mcs-gfp و pci-neo مورد تزریق درون ماهیچه ای قرار گرفتند. موش های کنترل تحت همان شرایط وکتور pci-neo و pbs دریافت کردند. خون گیری قبل از تزریقات انجام شد. تیتراسیون سرم نشان داد که موش های balb/c تست تزریق شده با dna واکسن در مقایسه با گروه های کنترل به طور موفقیت آمیزی ایمن شده اند و در چالش با باکتری e.coli o157:h7 به صورت دهانی، محافظت نشان دادند. وکتورهای حاضر dna واکسنی بوجود آوردند که ایمنی محافظتی را به تنهایی یا در ترکیب با دیگر شیوه ها ایجاد می کنند. روش کار به شرح زیر بود: 1- طراحی وسنتز ژن نوترکیب وپرایمرهای اختصاصی آن 2- همسانه سازی قطعه ی موردنظر در وکتور dna واکسن و تراریخت نمودن آن در میزبان موقت 3- تخلیص وکتور همسانه سازی شده از میزبان موقت به مقدار زیاد 4- تزریق آن به موش وسنجش ایمنی زایی از طریق الایزا 5- خوراندن باکتری e.coli o157:h7 به موش و بررسی ایمنی زایی dna واکسن 6- انتقال وکتور dna واکسن به سلولهایt293 در محیط کشت و بر رسی بیان با استفاده از مارکر فلورسانس gfp که در زیر میکروسکوپ فلورسانت به رنگ سبز فسفوری دیده می شود.
منابع مشابه
کلونینگ، بیان و تعیین خصوصیات لیپاز کایمریک باسیلوس ترموکاتنولاتوس در باکتری Escherichia coli
لیپازهای باکتریایی عضوی از خانواده β/α هیدرولازها هستند که تری آسیل گلیسرول ها را در فاز بین آب-چربی هیدرولیز می کنند. لیپاز باکتری باسیلوس ترموکاتنولاتوس (BTL2) در دمای 75-60 درجه سانتیگراد و pH برابر 10 -8 فعالیت دارد و مناسب استفاده در صنعت شوینده می باشد. در این پژوهش لیپاز باسیلوس ترموکاتنولاتوس کایمریک حاوی توالی توافق شده لیپاز قارچ کاندیداروگوزا (207Gly-Glu-Ser-Ala-Gly211)در ناحیه زانو...
متن کاملThe effect of cyclosporine on asymmetric antibodies and serum transforming growth factor beta1 in abortion-prone model of mice CBA/J x DBA/2
كچ ي هد فده و هقباس : ي ک ي طقس زورب للع زا اه ي ،ررکم ا لماوع تلاخد ي ژولونوم ي ک ا رد ي ن قم طققس عون ي وراد دقشاب ي س ي روپسولک ي ،ن ح لدم رد طقس شهاک بجوم ي ناو ي CBA/j×DBA/2 م ي تنآ ددرگ ي داب ي اه ي ان و راققتم TGF-β لماوع زا عت مهم يي ن گلماح تشونرس هدننک ي سررب روظنم هب رضاح هعلاطم تسا ي ات ث ي ر اس ي روپسولک ي ن م رب ي از ا ي ن تنآ عون ي داب ي س و اه ي اکوت ي ن TGF...
متن کاملتولید یک پروتئین کایمریک نوترکیب از ژن صناعی حاوی قطعاتی از پروتئین های espa و intiminاز escherichia coli o157:h7 و بررسی ایمنی زایی آن در موش
چکیده: اشریشیاکلی انتروهموراژیک o157:h7(ehec) در انسان موجب عفونت های روده ای از فرم اسهال بدون خون ریزی تا کولیت هموراژیک و سندروم اورمی همولیتیک (huc)می شود. انتقال e. coli o157:h7 از طریق آب و غذای آلوده بوده و مهمترین و اصلی ترین مخزن این باکتری حیواناتی مانند گاو و گوسفند می باشند. این باکتری قادر است که آسیب های attaching/effacing ((a/e در سلول های اپیتلیال روده میزبان ایجاد کند. محصول پ...
15 صفحه اولThe Study of Stressful Factors in Clinical Education for Nursing Students Studying in Nursing and Midwifery College in Khorramabad
کچ هدي پ شي مز هني فده و : شزومآ لاب يني شخب ساسا ي شزومآ مهم و راتسرپ ي تسا . و هنوگ ره دوج لکشم ي شزومآ رد لاب يني ، آراک يي هدزاب و ا ني شزومآ زا شخب راچد ار لکشم م ي دنک . فده اب رضاح شهوژپ سررب ي لماوع سرتسا از ي شزومآ لاب يني رد وجشناد ناي راتسرپ ي هدکشناد راتسرپ ي و يامام ي ماـجنا داـبآ مرـخ تسا هتفرگ . شور و داوم راک : رضاح هعلاطم کي هعلاطم صوت يفي عطقم ي تسا . د...
متن کاملبیان فاکتورهای اصلی نوترکیب EspA-Intiminاز باکتری E. coli O157:H7 در گیاه تنباکو به منظور تولید واکسن خوراکی
یکی از پاتوژن‌های مهم ایجاد‌کننده کولیت هموراژیک و نشانگان همولیتیک اورمیک در انسان باکتری اشرشیاکلی هموراژیک سویه O157H7 می‌باشد. دام‌ها اصلی‌ترین مخزن این باکتری می‌باشند. دو فاکتور پروتئینی با اهمیت در کلونیزاسیون باکتری در اپیتلیوم روده EspA و Intimin هستند که باعث ایجاد آسیب‌های تخریبی به‌واسطه اتصال می‌گردند. این پروتئین‌ها توسط جزایر بیماری‌زایی LEE (Locus of Enterocyte Effacement) کد می...
متن کاملهمسانه سازی و تولید یک پروتئین کایمریک نوترکیب در escherichia coli از ژن صناعی حاوی قطعاتی از intimin و tir از escherichia coli o157:h7 و بررسی ایمنی زایی آن در موش
اشریشیا کلی انتروهموراژیک (ehec) o157:h7 عامل بیماری التهاب روده خون ریزی دهنده می باشد و مهم ترین مخزن این باکتری گاو است. با وجود شیوع کم این باکتری، شدت بیماری های ناشی از اشریشیا کلی بیماری زای روده ای، نگرانی هایی راجع به ایجاد واکسن های موثر پدید می آورد(?). پس از تولید سمی شبیه شیگاتوکسین، ابتدایی ترین عامل بیماری زایی ehec o157:h7 کلونیزاسیون آن بر اپی تلیوم روده است که منجر به ایجاد آس...
15 صفحه اولمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شاهد - دانشکده علوم پایه
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023